免疫組織化學(xué)方法成功與否關(guān)鍵在于抗原決定簇的保存和暴露。組織經(jīng)甲醛固定，甲醛的醛基與抗原蛋白的氨基交聯(lián),使決定簇的構像改變，從而影響檢測蛋白表達。要充分暴露抗原決定簇，通常用到抗原修復鍋。強烈推薦APTUM公司最具有競爭力的一款產(chǎn)品，適于甲醛固定的組織經(jīng)石蠟包埋后進(jìn)行免疫染色前的處理，配合特別的抗原修復緩沖液確保得到最高質(zhì)量的免疫染色效果。

l  一次可以在6種不同緩沖液中運行，進(jìn)行抗原暴露

l  僅暴露抗原決定簇，不損傷組織的形態(tài)

l  實(shí)驗結果穩定，結果重現性高

l  系列的玻片在獨立環(huán)境中經(jīng)過(guò)處理

抗原修復鍋怎樣工作？

    看上去，抗原修復鍋似我們烹飪的高壓鍋。這是一款功能獨特的“高壓鍋”，主要用于抗原暴露的工作，主要的工作原理也是裝玻片的幾個(gè)分室可以達到高溫(>120°C)高壓。靈敏的傳感控制器來(lái)保持一定的溫度和壓力及一定的時(shí)間，這些工作參數都是經(jīng)過(guò)嚴格的科學(xué)實(shí)驗得到的數據。當達到需要的溫度，抗原修復鍋會(huì )在該溫度下保持幾分鐘，之后鍋內玻片被冷卻2個(gè)多小時(shí)，特殊設材質(zhì)的內鍋體控制了鍋和玻片的冷卻速度。

誰(shuí)是受益人？

l  研究病理的實(shí)驗室，那里需要高質(zhì)量染色圖片（用來(lái)發(fā)表）的工作人員

l  缺乏技術(shù)人員的實(shí)驗室，學(xué)生和博士后均可以處理玻片進(jìn)行組織染色，且不需要很多時(shí)間來(lái)摸索

l  小型病理實(shí)驗室，每天處理的玻片數量有限

l  樣本昂貴稀有，或如組織芯片，或如獨一無(wú)二的組織樣本，利用抗原修復鍋，簡(jiǎn)單可靠

怎樣選擇一種緩沖液（Buffer）？

    如果你已經(jīng)知道哪種緩沖液用在微波的某種組織抗原修復，那么用抗原修復鍋時(shí)，這種緩沖液也同時(shí)適用的機會(huì )很大。我們提供四種即用型緩沖液R-Buffer A/B/C/U，同時(shí)也提供同種更加溫和的組織處理緩沖液，我們稱(chēng)之為G系列，R-Buffer AG/BG/CG/UG。

    選擇Buffer，主要考慮以下兩點(diǎn)：

1.  抗原的自然特性以及所選擇的抗體

抗原自身特性和抗原的位置都是首要考慮。我們建議你剛開(kāi)始的時(shí)候選擇抗原表達環(huán)境的最適Buffer。以下是經(jīng)驗供大家參考：

Most of the nuclear antigens (apoptosis-related, survival-related, proliferation-related) R: Buffer A (or AG).

Cell adhesion molecules, cell membrane antigens (extracellular domain) R: Buffer A (or AG)

Cytoskeleton and cytoskeleton-associated molecules – R:Buffer A (or AG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer B (or BG)

Intracellular domain of some adhesion molecules and surface receptors – R:Buffer C (or CG)

Most of antibodies raised against a linear peptide – R: Buffer U (or UG)

2.  固定液以及固定程度

建議的組織切片的抗原修復處理是一種針對普通的適化狀態(tài)切片。如果用來(lái)切片的組織塊沒(méi)有充分固定，或者過(guò)固定（留在福爾馬林溶液中時(shí)間過(guò)長(cháng)），或者用了其它的固定液，那么，處理組織切片的流程方案需要重新修訂，最便利的辦法是選擇使用G系列緩沖液。對于過(guò)固定的材料一般推薦用U buffer，或者在同一Buffer里面增加循環(huán)。

產(chǎn)品參數：

  使用抗原修復鍋進(jìn)行染色的效果示例

1.福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結腸組織切片，經(jīng)抗原修復鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer C (pH 6.0)，組織玻片降溫過(guò)夜，抗體MIB-1，抗原Ki-67，R-Detect HRP系統染色

2.福爾馬林固定，石蠟包埋，人乙狀結腸組織切片，經(jīng)抗原修復鍋進(jìn)行抗原暴露，R-Buffer A (pH 8.1)，組織玻片降溫過(guò)夜，抗體#4B11，抗原CD8 (cell membrane)，R-Detect HRP系統染色。

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