電鏡銅網(wǎng)和支持膜問(wèn)與答
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??? 在日常的技術(shù)支持工作中，經(jīng)常碰到不同的客戶(hù)的同一個(gè)問(wèn)題，回答的多了，就慢慢總結出來(lái)大多數實(shí)驗者急需知道的知識。這里列舉一二，供大家參考。
1.銅網(wǎng)、碳支持膜、微柵、超薄碳膜、多孔膜有什么區別？
?銅網(wǎng)：平常做透射電鏡所用的銅網(wǎng)，即為承載樣品的載網(wǎng)。載網(wǎng)若是銅材質(zhì)，就稱(chēng)銅網(wǎng)，如果是鎳、鉬、金、尼龍，就相應的稱(chēng)鎳網(wǎng)、鉬網(wǎng)、金網(wǎng)、尼龍網(wǎng)。銅網(wǎng)也稱(chēng)“裸網(wǎng)”。主要應用在生物制樣中，可配合切片機，在水槽中用“裸網(wǎng)”撈取樣品。再進(jìn)行噴碳處理，然后進(jìn)入電鏡觀(guān)察。
碳支持膜：大多數透射電鏡樣品在制樣時(shí)，為了確保樣品能搭載在“載網(wǎng)”上，會(huì )在“載網(wǎng)”上覆一層有機膜，稱(chēng)為“支持膜”。這種具有支持膜的載網(wǎng)，稱(chēng)為“載網(wǎng)支持膜”。當樣品接觸載網(wǎng)支持膜時(shí)，會(huì )很牢固的吸附在支持膜上，不至于從載網(wǎng)的孔洞處滑落。以便在電鏡下觀(guān)察。
當樣品放在電鏡中，“載網(wǎng)支持膜”會(huì )被電子束照射，有機支持膜上就會(huì )產(chǎn)生電荷積累，也會(huì )引起樣品放電，發(fā)生樣品飄逸、跳動(dòng)、支持膜破裂等情況。所以，人們考慮在支持膜上噴碳，提高支持膜的導電性，達到良好的觀(guān)察效果。這種經(jīng)過(guò)“噴碳的載網(wǎng)支持膜”，簡(jiǎn)稱(chēng)“碳支持膜”，一般膜厚度為10-20nm。
從制作成本和使用效果看，銅網(wǎng)最經(jīng)濟實(shí)用，所以被普遍采用。因此，人們經(jīng)常提到的“銅網(wǎng)支持膜”、“碳支持膜”、“碳膜”、“方華膜”等，甚至被誤稱(chēng)的“銅網(wǎng)”，在我們的產(chǎn)品里面，就成為“碳支持膜”。注意，碳支持膜實(shí)際上是兩層膜，一層有機膜（方華膜），上層碳膜。
微柵支持膜?微柵是支持膜的一個(gè)品種，它是在制作支持膜時(shí)，特意在膜上制作了微孔，俗稱(chēng)“微柵”，它主要是為了能夠使樣品搭載在支持膜微孔的邊緣，以便使樣品“無(wú)膜”觀(guān)察。無(wú)膜的目的主要是為了提高圖像襯度。
所以，觀(guān)察管狀、棒狀、納米團聚物等，常用“微柵”支持膜，效果很好。特別是觀(guān)察這些樣品的高分辨像時(shí)，更是最佳的選擇。
一般直徑小于20nm的粉體才直接撈，顆粒再大則是包埋后離子減薄。撈樣品常用的有碳支持膜和小孔微柵，小孔微柵上其實(shí)也有一層超薄的碳膜。
超薄碳膜?也是支持膜的一種。它是在微柵的基礎上，疊加了一層很薄的碳膜，一般3-5nm。這層超薄碳膜的目的，是用薄碳膜把微孔擋住。既然微柵觀(guān)察效果最好，為什么還要把孔擋住呢？這主要是針對那些分散性很好的納米材料，如：10nm以下的樣品，分散性極好的樣品。
多孔碳支持膜?據有普通碳支持膜和微柵支持膜共同特點(diǎn)的產(chǎn)品。普通碳支持膜以觀(guān)察形貌和考擦分散性為主，微柵支持膜以看高分辨為主。由于多孔膜有較大的支持膜面積，膜上又偶有微孔，這樣就可以兼得納米微粒的分散性考察和形貌像、高分辨像獲取。是一款很實(shí)用的支持膜產(chǎn)品。我公司代理的德國Quantifoil公司生產(chǎn)的Quantifoil多孔碳支持膜，與普通多孔碳膜相比，其固定的幾何外形便于在TEM上進(jìn)行自動(dòng)化操作?？妆砻娣e大，可降低支持膜干擾造成的樣品失真。這在電子衍射，電子能量損失譜成像和暗場(chǎng)成像中非常重要?？捎糜谥纬√寄せ蛑苯幼鳛檩^大樣品的載體。此種膜還可應用于物質(zhì)納米特征研究，如生物大分子復合體在載體自由懸層的研究。膜孔徑的定制范圍為1-7μm。膜厚度：18-20nm。
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2.觀(guān)察長(cháng)度不等的納米管的高分辨，選用哪種膜最好？
??? 看納米管一般有兩個(gè)目的，一是看長(cháng)度，主要用低倍觀(guān)察；二是看管壁，主要是看高倍像。無(wú)論長(cháng)度多少，只要看高倍像，特別是高分辨，最好用微柵膜或多孔膜。它既可以滿(mǎn)足低倍觀(guān)察長(cháng)度，也可以滿(mǎn)足高分辨觀(guān)察的要求。但是你一定要選擇“高分辨透射電鏡”（HRTEM），否則，你的微柵膜就很難發(fā)揮作用。通常情況下，好的“碳支持膜”也能看到碳納米管壁的高分辨像，但它一定不會(huì )超過(guò)用“微柵膜”觀(guān)察的效果。理由是：微柵膜上有孔，管壁可以在微柵的孔洞處觀(guān)察，而碳支持膜沒(méi)有孔，膜層背底會(huì )影響高分辨的觀(guān)察。粉末樣品也是同樣的道理。
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3.觀(guān)察納米材料和生物材料用什么銅網(wǎng)支持膜合適？
??? 第一次選購碳支持膜，往往不知道選用哪種目數的銅網(wǎng)支持膜合適。通常情況下，做納米材料，選用300目或200目銅網(wǎng)碳支持膜較適宜；做生物材料（切片樣品），選用200目或150目銅網(wǎng)碳支持膜較適宜。
??? 如果做納米材料（50nm以下），而且要看高分辨像，最好選擇微柵；如果做納米材料（10nm以下），樣品分散性很好，最好選用超薄碳支持膜。但前提是要用高分辨電鏡（200kV以上）。如果使用的是100kV的電鏡，不必要選用微柵膜。
?4.免疫電鏡實(shí)驗一般要選擇哪種網(wǎng)？
??? 免疫電鏡用載網(wǎng)要選用鎳網(wǎng)或金網(wǎng)，而不用銅網(wǎng)，因銅網(wǎng)會(huì )與某些化學(xué)物質(zhì)產(chǎn)生反應而影響標記結果。
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